Interprétée par Joana Metrass

Enfant, Guenièvre vit dans le village où se trouve l'arbre de Merlin. Proche d'Arthur, elle apprend que le sorcier a prophétisé son accession au trône de Camelot et qu'il souhaite en faire sa reine.

Bien des années plus tard, après avoir extirpé Excalibur de sa pierre, Arthur revient dans son village entourés des ses chevaliers, montrant à la foule l'épée faisant de lui le roi. Plus tard, elle est délaissée par un mari obnubilé par la dague du ténébreux pour reformer l'épée. Le jour de son anniversaire, elle tente en vain de lui faire profiter de la fête mais finit par y assister seule. Cependant, elle est approchée par Lancelot, qui l'invite à danser. Guenièvre décide de partir en quête de la dague grâce au gantelet de Merlin, et convainc Lancelot de se joindre à sa cause. 

Le lendemain, tous deux sont guidés vers le caveau du ténébreux, dans lequel ils pénètrent. À l'intérieur, Lancelot est attaqué par les ténèbres que Guenièvre fait fuir grâce à une torche, puis l'embrasse. Par la suite, ils trouvent un portail les menant dans une clairière où la dague est exposée. Ravie, elle essaye de s'en emparer mais Rumplestilstkin apparaît soudain et propose un marché à la reine : le gantelet contre du sable d'Avalon capable de réparer tout ce qui est cassé. Intéressée, elle n'écoute pas Lancelot et procède à l'échange.

De retour à Camelot, Guenièvre fait ses adieux à Lancelot, qui décide de quitter le royaume. Une fois dans la tour de Merlin, elle est interrogée par son mari à qui elle annonce avoir retrouvé la dague. Toutefois, elle est déçue par son emballement et raconte sa rencontre avec Rumplestiltskin, avant de présenter le sable magique d'Avalon. Arthur indique l'avoir vue avec Lancelot, avant de s'emparer du sable. Il en jette alors une poignée sur elle, la forçant à retrouver son amour pour lui, puis en déverse par la fenêtre pour reconstruire le château.

Cinq ans plus tard, Guenièvre est présentée aux invités de son époux à leur arrivée au château de Camelot. Le soir venu, elle participe au bal puis retrouve Arthur dans la salle de la Table Ronde pour lui rapporter le décès de Perceval, avant de révéler ses craintes au sujet des nouveaux venus. Arthur la rassure alors et lui rappelle que la Sauveuse permet de reconstituer l'épée. 

Lors de l'adoubement de David, Guenièvre accroche les armes du nouveau chevalier sur l'ancien siège de Lancelot. Elle observe par la suite son époux ranger la couronne pourpre subtilisée à David pour empêcher les invités de communiquer avec Merlin.

Le lendemain, Guenièvre surprend une conversation entre Arthur et David au sujet de Lancelot dans la salle de la Table Ronde. Elle exige alors de savoir où il se trouve pour régler ses comptes, et indique à David que le chevalier lui a volé bien plus qu'un baiser. Elle assiste ensuite à l'ouverture de l'étui de David, dans lequel la dague a été subtilisée. Plus tard, ne voyant pas Arthur revenir, elle envoie les chevaliers dans la forêt et retrouve son roi emprisonné au Café Mère Grand. Venue le libérer, elle approche Lancelot à qui elle retire Excalibur, avant d'ordonner son emprisonnement. Sous les ordres d'Arthur, elle utilise ensuite et le sable d'Avalon sur David et Mary Margaret pour les rallier à leur cause.

Après la libération de Merlin, Guenièvre suit Arthur dans la tour du sorcier où elle regarde inquiète son époux confectionner une potion capable de réduire à néant ses ennemis. Quelques temps plus tard, tandis qu'Excalibur est de retour dans sa pierre à cause de Crochet, Guenièvre aperçoit un nuage violet s'abattre sur le royaume.

Touchée par la Malédiction, Guenièvre se retrouve privée de ses derniers souvenirs et propulsée dans les bois de Storybrooke. Elle finit par retrouver son époux avec joie avant de constater la disparition d'Excalibur. Elle se rend au poste de police avec Arthur pour en apprendre plus. Pour réconforter son peuple, elle propose d'organiser une fête, idée rapidement reprise par Mary Margaret. Le soir venu, durant la fête foraine, elle apprend qu'Emma possède Excalibur et que les habitants de la ville savent que la dague est le morceau manquant de l'épée. 

Plus tard, Guenièvre et son époux, reçoivent la visite de David qui révèle les mensonges d'Arthur au grand étonnement de Guenièvre qui s'écarte et observe son mari prendre la fuite.

Après la mort d'Arthur et la menace de la destruction de la magie, Guenièvre regagne son royaume avec ses sujets en empruntant le portail créé par Zelena.